微生物检验技术论文2如何写 微生物检验毕业论文(7篇)

在日常学习、工作或生活中，大家总少不了接触作文或者范文吧，通过文章可以把我们那些零零散散的思想，聚集在一块。写范文的时候需要注意什么呢？有哪些格式需要注意呢？以下是小编为大家收集的优秀范文，欢迎大家分享阅读。

最新微生物检验技术论文2如何写一

我叫-，20xx年4月来公司担任质量管理部经理一职。数月来，我重点负责gmp认证有关工作和质量管理部日常工作，虽然涉及面广，头绪多，但在公司张总的带领下、在其他班子成员的配合下，在本部门同事的热情支持和帮助下，努力履行着自己分管的所有工作，现就多半年来的工作从以下几个方面进行汇报：

1、服从工作安排，积极投身制水系统改造20xx年3月30日我正式聘入公司开始工作，一周后被临时安排负责制水系统的现场监管和联络工作，该系统主要设备为二级反渗透装臵，从设备设计、选型、采购联络、安装及调试运行各环节，我和qa积极参与和实践，对采用二级反渗透制水设备提出了自己明确的意见和主张，并获得大家的一致认同；在该设备选购过程中，我们积极联系生产商，在8小时内迅速联系到4家制水设备生产商，为公司紧张有限的订货期限赢得选择的时间和空间，有效地缓解和避免了设备采购的紧迫性和盲目性，为启动预备采购方案做了积极地铺垫和补充。二级反渗透制水设备从到厂安装至纯化水水质合格运行累计7天，在此期间，我全面跟踪，加班加点，全心关注和学习制水系统的制水、分配、循环和储存等各个环节，积极参与活性炭柱、石英砂柱的更换和清洗，耐心检查、督促和协调现场安装、运行过程中出现的各种各样问题，并下班后整理成书面报告，次日及时向上级汇报，使存在的问题得到有效落实和解决，促进了制水系统硬件改造的顺利完成。通过学习和实践，我们了解了二级反渗透系统制水原理，维护保养，操作使用方法，提升了业务技能；同时践行了科学、高效的工作方法，为今后的有效管理提供了方法借鉴。

2、加强现场巡查，促进硬件改造整体推进20xx年4月是公司硬件设施处于全面改造的关键时期，除制水系统外，空气净化系统、厂房设施、设备维护等系统和项目均需不同程度的技术处理或维护措施，波及到生产、质量、工程、物料等多个部门，繁杂多样的问题和矛盾容易集中凸现，在此期间，我每天下午16：00后深入基层一线，检查和记录发现的各种问题，并通过检查记录整理汇报落实再检查循环工作模式不断加以解决，截止7月，共计各类检查22次，累计各类问题达130个。通过加强现场巡查和监督，加快了硬件的快速改进，对推动gmp认证进程发挥了积极作用。

3、安排和部署验证总体计划，主动完善相关验证活动 验证是实施gmp的基础，也是gmp认证检查必不可少的内容，为了搞好验证实施，保证验证活动有序开展，我结合公司实际，制定了一份较为系统而详尽的验证总体时间安排计划，主要为净化空气系统、空压系统、设备验证、设备清洁验证及产品工艺验证的具体时间安排，为公司各类验证活动有计划、有步骤实施提供了工作主线和依据，该计划内容基本覆盖了公司所有的关键验证对象和系统，符合gmp验证内容的原则要求，验证时间有条不紊，与生产时间相吻合，合理安排了生产和验证活动，体现了生产活动与验证实施相辅相成，相互统一的本质规律。由于验证工作量大，我主要负责空气净化系统、空压系统及设备清洁验证活动的实施，累计完善验证项目25个，其中涉及公用设施验证8个，设备清洁验证17个，达到了共用系统验证、关键的生产工艺设备清洁验证全覆盖的目标要求，为gmp认证检查创造了坚实基础和条件。

4、参与物料和设备供应商审计，积极履行质量监管职责 20xx年4月12月

期间，我先后4次对药材供应商进行实地考察，第1次考察药材供应商为个体，其主要经营门店为东郊万寿路药材市场，按gmp要求，其不符合供货资质条件，主要原因为：1.该供应商为证照挂靠经营；2.药材饮片加工场所无gmp证书；3.饮片贮存条件不符合gmp要求；4.供应商gmp观念淡薄，饮片包装形式不符合公司质量要求。现场考查结束后，我及时向上级领导书面汇报了考察情况，并明确提出有关处理意见，即不得从该供应商购进药材或饮片。第2次考察主要对象为西安中药饮片厂、西安盛兴中药饮片厂，考查结果确认符合审计要求，并明确向上级领导作了交换意见，要求今后中药材应从通过gmp认证中药饮片厂购进，并有qa共同参与确定供应商。借鉴中药材供应商现场考查的办法和经验，随后对2家真空减压浓缩罐生产商进行了实地考察，并将考察结果和意见向公司领导作了书面汇报。第3、4次主要考察了多种名贵药材和问题药材如鹿茸、红参、淫羊藿、韭菜子的来源，通过市场调查了解了药材质量状况和现状，开拓了视野，增长了见识，对把好药材源头质量关具有十分重要的意义。总之通过物料或设备供应商的现场考查和信息反馈，为公司提供了良好改进建议，并增强了相关部门和工作人员的gmp意识，显示了质量监管的价值和重要性，同时为推进gmp实施做出了积极和正确的引导。

5、积极参与gmp文件的修订及会审，巩固和完善软件新成果 修订和审核文件是日常工作内容必备可少的一部分，gmp认证检查前，我主要参与了质量管理部门相关文件和技术文件的修订、审核，文件类别有《质量手册》1个，《程序文件》22个，《工艺规程》11个，《质量标准》文件累计116个，囊括了中药材、原辅料、包装材料、中间体及成品所涉及的所有标准，检验操作规程79个，质量管理文件47个，其中对“十七味补肾膏”、“荣发胶囊”、“感冒退热颗粒”等产品工艺规程进行了反复复核和及时会审，保证各产品工艺与产品批准证明文件所规定的内容相一致；通过对《质量标准》的修订和实施，对进一步健全质量保证体系，控制产品质量起到良好的促进作用。删除了质量管理文件、卫生管理文件与客观实际情况不相适应的部分，使文件更加切合实际和具有可操作性，更好地满足规范指导生产和检活动的要求；积极协助qa修订、审核产品召回管理规程，删繁去冗，去粗取精，使其召回程序和活动与国家相关法规制度要求相一致，文件层次脉络清楚，面貌焕然一新；gmp认证后，《中国药典》（20xx年版）的颁布实施，我积极督促相关质量标准和检验操作规程的修订，使相关文件与药典标准有效接轨，保证新旧标准体系平稳过渡。

6、开展和参与gmp培训，推动生产质量管理跃上新台阶 实施gmp管理是药品生产企业保障药品质量的一个永恒主题，今年是公司迎接gmp再认证的关键年份，在投入资金做好硬件改造的同时，软件的提升也是gmp认证检查的一项十分重要的内容。为此，从20xx年4月份起，公司就开始着手准备对员工培训的准备工作，进入5月份，gmp培训已提上工作议事日程，由人事行政部会同质量管理部、生产技术部、设备工程部、物料部相关部门负责人及技术人员分别制定了各部门的年度培训计划，并由质量管理部参与制定了公司级的gmp培训计划，公司级的gmp培训计划及内容主要体现法规政策、gmp规范、微生物基础知识及产品生产工艺技术等内容，部门级培训主要内容为各相关岗位sop培训。6月～

7月份，gmp培训全面展开，我培训讲授的内容是《中华人民共和国药品管理法》《药品管理法及实施条例》、gmp自检、设备清洁验证等相关内容，各相关岗位的人员大部分均参加了培训，80%的人员培训成绩优异，培训总计4次，累计时间达6小时。gmp认证通过后，我积极按公司培训计划要求，先后对销售部工作人员法规政策和产品知识方面的培训，主要内容有《中华人民共和国药品管理法》、《药品说明书和标签管理规定》、《药品召回管理办法》、《药品不良反应报告和监测管理办法》、《脱发与治疗》等，累计4小时；对煎膏剂车间进行验证管理等方面知识的培训，累计4小时。通过多层次、多角度的培训，使员工懂得按gmp组织生产是法律明确要求，更加清晰了假药和劣药的概念，了解了什么行为是合法的，什么行为是违法的；使药品销售人员学会正确用法律的武器武装自己的头脑，并掌握和了解了荣发胶囊治疗脱发过程的基本机理及其治疗特点和不足，对正确评估产品疗效有了全面而客观的认识，有助于该品营销活动过程中的技术交流和宣传。总之，培训使员工的法制意识和gmp意识大大提高，为实现质量管理体系的良好运行奠定了基础和前提。 7、尽职尽责，努力当好排头兵 能担任质量部经理一职是上级领导和大家对我的信任，因而我觉得要身体力行，做出表率。为了做好本职工作，我在思想上积极要求上进，除认真学习国家有关药品法律、法规政策外，还坚持每天尽量浏览和阅读国家经济、政治、文化等方面的理论知识，不断提高自身的政治理论素养。在思想作风上实事求是，表里如一；在工作作风上认真严谨，坚持民主，每逢重大问题，能坚持跟领导或同事协商的原则，不搞独断专行，不搞一言堂，更不搞强迫命令，在工作中，都能发挥集体智慧，把每一项工作做好。讲求实效；待人处事上光明磊落、诚实、守信；在工作期间做到衣着整洁得体、语言文明规范，努力在各方面使自己能成为标兵。虽然作为质量部经理，但我从没有搞过特殊化，自进厂工作以来，我从没有无故缺席、迟到或早退，有事请假。认证期间坚持无条件加班，积极配合公司领导的工作安排，做到了以身作则。作为质量管理部经理，应是总经理的助手和智囊团成员，因此，我非常重视团队精神和服从意识，深知思想和行动上与保持一致才是提高工作效率的思想基础，领导安排的工作任务能积极配合协助或独立完成，我经常深入基层一线，并把存在的问题和自己的意见及看法能及时给公司反馈，发挥了员工和公司之间的桥梁和纽带作用。

综上所述，任职近一年来，虽然在自己的岗位上做了一些工作，取得了一定成绩，但还存在薄弱环节，主要表现在：

1、对有关理论掌握仍不透彻，需继续加强理论学习，提高理论水平。

2、对质量管理的工作经验不足，对理化分析和微生物检验方面的知识学得不够多，不够精，需在下步工作中认真总结，提高业务技能。

3、下车间检查次数少，深入车间检查还应更扎实一些。

4、本人自信心不足，工作中主观能动性和创新性不够。

最新微生物检验技术论文2如何写二

（1）实习时间：20xx年08月16日至20xx年11月29日

（2）实习地点：xx市城市排水监测站

（3）实习性质：生产实习

xx市城市排水监测站技术实力雄厚，监测设备、分析仪器配置齐全。现中高级专业技术人员占全员的50%以上。单位总面积3000余平方米，实验室面积达到1800余平方米，拥有lc—ms、icp—ms、aas、afs、uv—vis、gc、hplc、两虫等现代分析仪器和其他常规分析设备，拥有管道内窥监测特种作业车辆两部、便携式检测设备等现场监测设备。能对水体、固体废物、气体、排水管道等进行监测分析。单位通过了国家计量认证和国家实验室认可，检验能力包括：城市污水、生活饮用水、地表水、地下水、污泥、流量等12大类产品共464项。

xx市城市排水监测站成立于1996年，xx增挂xx市水质监测中心牌子，20xx年增挂xx市水土保持监测站牌子；是xx市水务局管理下的正处级参照公务员管理事业单位。负责xx市江、河、湖、库水质水量监测和城乡供水、排水水质监测以及水土保持监测等工作。单位内设行政部、排水监测部、供水监测部、水保监测部、检验部、质控部、信息部七个部门。

xx市城市排水监测站建站十年，多次获得xx政府、行业各项荣誉：被市委市政府评为“青山绿地、蓝天碧水”工程先进单位；党支部多次被主管局评选为“先进党支部”；测检科巾帼文明岗被评为省级巾帼文明岗；监测科荣获市级青年文明号称号；综合档案管理达省一级标准等等。

建站以来，xx市城市排水监测站完成了对xx市近百条河涌及近千家排污单位的水质、水量的普查监测工作，摸清了xx市的排水水质、水量状况，已掌握xx市各种水体的监测数据30多万个；开展了多个城市污水处理厂的水质、水量在线监测项目，并对城市污水处理厂的污泥进行了监测分析和多种处置途径的探讨试验；开展了城市下水道可燃有害气体监测，参与了《xx市城市排水管理办法》的修编等工作，多次成功进行了排水事故污染源调查和监测，为有关部门及时指挥抢险提供了科学依据。多年来，xx市城市排水监测站为维护市政排水设施、xx的城市污水处理、创建国家卫生城市和市领导对截污、治污工程的决策、保证公共财政资金的投入效益和人民群众利益，做了应有的贡献。

当前，xx经济社会发展已进入“十一五”新的关键时期。新的形势和任务对排水监测工作提出了更高的目标和要求。xx市城市排水监测站将进一步树立“以人为本、科技为先，在发展中构建和谐排水监测站”的理念，以保障人民群众生命和健康安全为目的，以服务xx实施科学发展战略为目标，继续做好监测事权工作，抓好污水厂在线监测等重点项目的实施，抓好重大突发事故的应急预案和快速反应，抓好技术创新，抓好专业人才队伍建设，力争在新的发展起点上，实事求是，真抓实干，以更新的技术、更多的成果、更高的品质、更好的服务回报社会各界，发展排水监测事业，为构建和谐xx作出应有的贡献。

实习期间，我在水质监测中心的供水监测部工作，监测部主要拟订和组织实施城市供水水质监测计划和工作方案。而我被安排为供水间的水质监测员，主要负责居民二次供水亚运管网水的现场检测与采样！二次供水的采样面对的是不同的生活小区居民，亚运管网水主要是在各个固定的亚运场馆。供水间有四名采样员，归供水监测部所管，采样员外出采样配备司机。

关于我在监测中心的工作期间，大致可以分为三个时间段：

1、了解时期

8月16号，第一次踏进单位的时候，单位里的一切对我都是陌生的。具体的工作流程是怎样的都不知道，呈现在眼前的一切不免牵起我心中的一片茫然，这就是我即将实习的单位，我必须尽快的融入它。第一天，我被安排跟着车队队长苏腾苏大哥到花都那些水厂采样，在停车场侯车时，小范对我说：“自己小心点，不要出差错，苏队做事很严格。”带着紧张的心情我上了车。也许是被小范吓着吧，在车上我只是有一句没一句地跟他瞎聊！

采样并不复杂，检测水的浊度就用哈希的2100q便携式浊度仪，测总氯余氯就用美国哈希的pcii余氯/总氯测定仪，测仪器的操作也很简单，一个上午下来我也学会了操作。采样流程：排水——测浊度，总氯余氯——采样瓶采集水样——标记填单——送水样到水样间。除了仪器的操作，苏队还跟我讲解了很多细节，如消毒药灼烧到什么程度，甚至是最简单的细菌瓶包扎等等。

2独立时期

对采样的工作有所了解熟悉后，刚开始时的那些紧张心情也慢慢的平静下来，工作期间每天按时上班，然后收拾仪器工具发车采样。开始工作的一个星期单位都安排我跟跟被人一同采样。经过一个星期的熟悉与了解，终于到了自己要单干的时候了！感谢单位信任我，一个星期的培训，现在自己一个人也游刃有余。当然，工作期间也并不是完全没有问题出现，尤其是在采居民二次供水时，遇上不能进的小区，那就要看你怎样和保安、用户沟通，或者趁别人进出时随同而入！再者，一些居民会反映一些用水问题，如水质有异味，水中有很多红虫等等的问题。如果这点方面的知识一点也不了解，真的不知道怎么解答他们的问题，当然，我是一个热心的人，为此，我自己回到学校是也上网找了相关的文档学习了解希望可以解答到他们。

3亚运时期

11月9号，亚运的逼近，二期的水质监测也正式启动，由于增城那边也有亚运场馆，我被外派到那边的监测点。亚运时期，也许是最为辛苦的时期，每天六点就爬起床，经过七八个钟的车程才能采完样回到单位。但我没有怨，也不能怨，自己的选择就要选择下去。外派地区除了测试总氯余氯、浊度之外，我还要用eclox便携式水质毒性分析仪或lumifoxxx手持式发光细菌毒性检测仪进行生物毒性测试。

eclox便携式水质毒性分析仪同时支持发光细菌法和化学发光法两种毒性检测方法。化学发光法毒性分析可用于恶劣测试环境的毒性检测，测试结果与发光细菌法等效。发光细菌法生物毒性分析试剂符合国际标准iso11348的规定，测试结果准确可靠。而lumifoxxx手持式发光细菌毒性检测仪是一种基于生物传感技术的毒性检测系统，根据发光细菌在新陈代谢时发光强度的变化进行定性和定量检测。该仪器使用发光细菌冻干试剂，当这些细菌处于有毒的环境中时，它们发出的光受到抑制，根据其光强度变化即可快速准确地测试出样品的毒性，可直接检测上千种潜在的毒性物质。其检测结果可与标准毒性物hgcl2或苯酚对照得出相应的毒性等级。（国标“gb/t15441—1995水质急性毒性的测定——发光细菌法”。）

经过一个月的生物毒性测试，从中我也总结出：水的生物毒性值大小不仅与水的温度，试剂的温度有关，还仪器是否水平，平稳有关。仪器上的生物毒性显示线在加试剂后6min后开始下降。而进行多个样品检测时，选用国产的lumifoxxx能有效地缩短检测的时间。而单样或少样时用eclox便携式比较适合。

下面再说说我们再水质监测中的一些常见的知识和问题吧！

首先就拿我们要现场检测的总氯余氯来说吧：

添加氯，作为一种有效的杀菌消毒手段，仍被世界上超过80%的水厂使用着。所以，市政自来水中必须保持一定量的余氯，以确保饮用水的微生物指标安全。但是，当氯和有机酸反应，就会产生许多致癌的副产品，比如三卤甲烷等。超过一定量的氯，本身也会对人体产生许多危害，且带有难闻的气味，俗称“漂味”。现在，大多数的专家达成共识，使用氯化水和饮用水中有氯化物的确和得癌几率有一定的关系。

2．红虫问题：

红虫是昆虫双翅目摇蚊科摇蚊的幼虫，摇蚊的整个生长发育过程包括卵、幼虫（红虫）、蛹和成虫（摇蚊）四个阶段。因此理论上讲，在二次供水的每个环节如有任何疏忽都会给摇蚊产卵带来机会，均会造成红虫污染饮水事件。

红虫滋生原因归结为：

由于管理不善，蓄水池长期未清洗消毒或清洗消毒不规范，池底积泥，池壁挂污，甚至苔藓滋生，这种环境适宜于红虫滋生寄养、繁衍后代。

水池密封不好或无防护网，导致蚊虫进入水池产卵、孵化。

未对新建或改建的二次供水设施、设备进行彻底的清洗和消毒，就并网投入使用，会给蚊虫产卵、孵化创造了条件。

红虫对环境的耐受力较强且繁殖迅速，不易被自来水中的氯杀灭。特别是炎热的夏季，高温容易使水中的余氯挥发较快，消毒能力降低，使红虫更容易存活，所以红虫污染饮水事件的发生频率在夏季显著增加。

3．至于异味的问题

漂：市政水中因为加入了过量的漂来消毒，难免会有一些剩余的漂进入家庭用水中；重金属：由于市政输水管道的老化，部分腐蚀的金属会以离子形式进入水中，导致水中重金属含量超标。

4．自来水中的重金属对人体有危害

市政自来水在离开水厂，到达用户家中时，会经过各种各样的水管。由于历史原因，大多数的市政水管已使用多年，且由各种不同材质的金属做成。水管会释放不同量的有害重金属到饮用水，比如铅、铜、汞等。长期饮用有重金属污染的水，会对人体造成各种危害。比如，铅会很大程度上影响儿童的智力发展。

根据生活饮用水卫生标准中可知：

集中式给水，除应根据需要具备必要的净化处理设备外，不论其水源是地面水或地下水，均应有消毒设施。取地下水直接供入管网的一次配水井，必要时，还应有除砂、防浑浊设施。

有关蓄水、配水和输水等设备必须严密。且不得与排水设施直接相连，防止倒虹吸。用水单位自建的各类贮水设备要加以防护，定期清洗和消毒，防止污染。

凡与水接触的给水设备所用原材料及净水剂，均不得污染水质。

集中式给水单位，应不断加强对取水、净化、蓄水、配水和输水等设备的管理，建立行之有效的放水、清洗、消毒和检修等制度及操作规程，以保证供水质量。

新设备、新管网投产前或旧设备、旧管网修复后，必须严格进行冲洗、消毒，经检验浑浊度、细菌、肉眼可见物等指标合格后方可正式通水。

在水质中心这几个月的实习，可以说，我们获益良多，我拓宽了自己的知识面，学习了很多学校以外的知识，甚至在学校难以学到的东西。虽然只是简简单单的取水样，但是从当中的每一个细节都是非常重要的，特别跟别人一起工作的时候，一定要麻利，决不能慢手慢脚，而且做事情要懂得灵活变通，总之就不能死板，否则，只会令人讨厌，这样就更加难与人家相处好。经过这次亲身到水质检测中心的经历，我对自己的专业有了更为详尽而深刻的了解，虽然没怎么用上学过的东西，但基础的知识还是很重要的。从这次实习总结中，我们体会到了实际的工作与书本上的知识是有一定距离的，并且需要进一步的再学习。另外，在就业心态上面也有很大改变，以前我总想找一份适合自己爱好，专业对口的工作，可现在我知道找工作很难，要专业对口更难，很多东西初到社会才接触、才学习。所以现在不能再像以前那样等待更好机会的到来，要建立起先就业再择业的就业观。应尽快丢掉对学校的依赖心理，学会在社会上独立，敢于参加与社会竞争，敢于承受社会压力，使自己能够在社会上快速成长，学会了解决处理简单问题的方法与技巧，学会了与员工同事相处沟通的有效方法途径。积累了处理有关人际关系问题的经验方法。同时我体验到了社会工作的艰苦性，通过实习，让我在社会中磨练了下自己，也锻炼了下意志力，训练了自己的动手操作能力，提升了自己的实践技能。积累了社会工作的简单经验，为以后工作也打下了一点基础。

另外每天较早就要上班工作，每天下午回宿舍，深感疲惫，很难有精力能再静下心来看书。这更让人珍惜在学校的时光。

感谢xx市水质监测中心给了我这样的一个实习机会，能让我到社会上接触学校书本知识外的东西，也让我增长了见识开拓眼界。感谢我的实习指导老师，在实习期间指导我在实习过程中需要注意的相关事项。感谢我所在的部门的所有同事，感谢你们对我的鼓励和包容，感谢瑜姐，苏队、庞哥、小杨、小刘等诸位，是你们的帮助让我能在这么快的时间内掌握工作技能，和你们合作我非常愉快。感谢宝哥，勇哥，杨哥等各位司机，谢谢你们每天载我去采样并教会我为人处事的道理。感谢在我工作时给予我帮助的所有人。

最新微生物检验技术论文2如何写三

（1）了解培养基的配置原理和方法，掌握分离培养微生物的有关准备工作。

（2）掌握高压灭菌方法及原理

（1）培养基的制备原理：

培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。

从营养角度分析：

营养：碳源、氮源、能源、生长素、水分和无机盐等；?适宜的酸碱度(ph值)和一定缓冲能力；?一定的氧化还原电位；?合适的渗透压。

琼脂是从石花菜等海藻中提取的胶体物质，是应用最广的凝固剂。加琼脂制成的培养基在98～100℃下融化，于45℃以下凝固，不容易被微生物污染。但多次反复融化，其凝固性降低。

（2）湿热灭菌原理－高压蒸汽灭菌

在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温

度也随之增加。在0.1mpa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。

实验材料与方法

配制培养基所需器材

实验设备：高压蒸汽灭菌器。

实验器材：500ml三角烧瓶、蓝盖瓶、5ml刻度吸管、培养基、天平、砝码、

称量纸、药勺、500ml、100ml量筒、牛皮纸、硫酸纸、橡皮筋、铁丝筐、平皿、剪刀等。

培养基等集中放讲台前高压桶内，送到洗刷室统一高压灭菌条件及注意事项

高压灭菌条件：121.3℃，15min。含糖培养基113℃，15min。

倒平板电炉加热灭菌好的培养基打开平皿包装倒平板（10块）注意事项：空气环境无菌（应在酒精灯火焰周围无菌区）。

a.在酒精灯火焰处，倾斜打开瓶口。

b.瓶口要过火焰。

c.左手掀开平皿小口。

d.倾注满皿底再多一点，约10ml（7cm直径平皿）。

e.推放一边要轻缓，不能晃起琼脂挂壁，易在培养过程中污染杂菌。

f.完全凝固再翻转平板放塑料筐内，4℃备用。

（1）如何证明培养基灭菌是否彻底?

把灭菌后的培养基按灭菌锅内的不同位置，每处抽取数管(瓶)，标上记号，置25℃～30℃培养一周左右进行检查。如果培养基没有什么变化，说明灭菌效果良好；如果某一位置的培养基出现了杂菌菌落，可能是摆放的太紧，导致蒸汽不畅，或锅的结构不合理等原因所致，应根据上述情况进行改进；如果大部分或全部菌种瓶都出现杂菌，说明灭菌温度或灭菌时间不够，应提高压力或延长灭菌时间。经过几次检验都证明能彻底灭菌后，以后按同样条件灭菌的则不必进行检查。

经过几次检验都证明能彻底灭菌后,以后按同样条件灭菌的则不必进行检查。

（2）为什么说消毒与灭菌是微生物学和临床医学必不可少的基本知识?由于病原生物广泛存在于自然界，可通过不同途径和媒介进入人体，引起感染或造成疾病流行。因此，杀灭或清除存在于体外传播媒介上的病原生物，对于切断传播途径、预防和控制其感染具有重要意义。自古以来，人们就利用煮沸、火烧、日晒等方法杀灭或去除微生物，达到预防疾病的目的。实际上，除了在临床医疗实践中需要防止微生物的污染或感染外，在微生物学实验室、食物保存、饮水净化、药品与生物制品生产等过程中都需要避免微生物的污染。

接种是微生物实验及科学研究中一项基本操作技术。根据实验目的和要求，

选择合适的接种工具与接种方法，接种工具有接种环、接种针、接种铲、接种钩、吸管、滴管、棉签等。常用接种方法有：斜面接种，液体接种，穿刺接种，平板接种和固体接种。接种的关键是无菌操作。

无菌操作的原则：在酒精灯火焰旁进行，所有器皿均须严格消毒，培养基应事先做无菌试验，

接种工具使用前后须经火焰烧灼灭菌，棉塞不能乱放，始终夹在手指中。在培养四大类微生物时应注意选择适宜的培养条件。多数细菌为专性需氧菌与兼性需氧菌，少数为厌氧菌。多数食品腐败菌和工业用菌种，以及人和动物病原菌的最适生长温度为37℃，并且在近中性（ph6.5～7.5）条件下生长良好。多数放线菌为好氧菌，少数为厌氧菌，最适生长温度为28～30℃，多数适宜在偏碱性环境中生长（ph7.5～8.5）。

（1）实验材料：实验设备：温箱。

实验器材：毛霉、曲霉、青霉、根霉、啤酒酵母、白假丝酵母、新生隐球酵母菌、细黄链霉菌、pda平板、高盐察氏平板、高氏合成i号平板、塑料筐、20%甘油水溶液、镊子、接种铲、无菌盖玻片、无菌滤纸、无菌载玻片、石棉网、牛皮纸、硫酸纸、橡皮筋、铁丝筐等。

（2）实验方法：平板接种：毛霉→pda平板（点植法）

啤酒酵母→pda平板（五区分离划线法）青霉、曲霉→pda平板（连续划线法）

1、取灭菌后小室平皿。

2、取无菌pda琼脂薄层平板，用镊子夹住盖玻片切割成0.5～1.0cm2的琼脂块，并将其移至培养小室中的载玻片上，制作过程注意无菌。

3、用接种环取少量霉菌的孢子接种于培养基四周，用无菌镊子

将盖玻片覆盖在琼脂块上，并(转载于:l灭菌的20%甘油（用于保持湿度），盖上皿盖，标记，置28～30℃培养3～5d

1.取粮食样品20g,放入无菌烧杯，加无菌水洗涤，

反复10次，弃去水后，将粮粒倒于平皿内备用2.镊子取粮食种入pda琼脂内，每皿可接种5-10粒。

放线菌的接种：取细黄链霉菌划线法接种，在接种的划线处，无

菌操作斜插入盖玻片数张。

1.空气环境无菌（应在酒精灯火焰周围无菌区）

2.在酒精灯火焰处，倾斜打开瓶口。

3.接种环使用前，直接在酒精灯上烧灼灭菌，把环和金属丝烧红即可。

4.接种环使用后，先在火焰周围把环上标本烤干，再烧灼灭菌，以免标本汽化，爆烈四溅，污染环境。5.金属杆快速通过火焰2－3次，杀灭表面微生物

1、粮食中产毒真菌的种类及产生毒素？

青霉、毛霉、曲霉、根霉、酵母、白念、细黄链霉菌（放线菌）青霉素、丝生毛霉素、黄曲霉素、根霉素、白念菌素。细黄链菌素

2、常用霉菌培养基有哪些？

马铃薯蔗糖培养基

豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）琼脂培养基察氏培养基

3、霉菌的接种方法有何不同？为什么？

（1）连续划线法（青霉、曲霉）

青霉与曲霉为局限性生长的霉菌。应采用连续划线接种法接种。（2）点植法（根霉、毛霉）

根霉与毛霉生长区域比较大，应采用点植法。（3）小室载玻片培养法（青霉、毛霉、根霉、曲霉）

实验三霉菌的制片与形态观察

实验目的：学习并掌握观察霉菌形态的基本方法；

了解四类常见霉菌的基本形态特征。了解放线菌的基本形态特征。

实验原理：霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约为3-10μm）,常是细

菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。霉菌菌丝较粗大，细胞易收缩变形，且孢子容易飞散，所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液，用此染液做霉菌制片的特点是细胞不变形，具有杀菌、防腐作用，不易干燥，能保持较长时间，能防止孢子四处飞散，棉兰具有一定的染色作用，染液的蓝色能增大反差。

（一）菌种：在马铃薯琼脂平板上培养3—4天的青霉(penicilliumsp.)、曲霉(aspergillussp.)、毛霉（mucorsp.）、根霉；

（二）器材及用具：镊子、载玻片、盖玻片、显微镜。

（一）直接制片观察

于洁净载玻片上，用镊子取霉菌菌落的边缘处取小量带有孢子的菌丝，然后小心地盖上盖玻

片。置显微镜下先用低倍镜观察，必要时再换高倍镜（二）小室培养观察

将载玻片直接放低倍镜下观察，再换高倍镜观察。

观察原则：

毛霉：用低倍镜观察孢子囊梗、囊轴等。用高倍镜观察孢子囊孢子的形

状、大小。

根霉：菌丝、孢子同毛霉，注意观察有无假根。

曲霉：在高倍镜下观察菌丝有无隔膜，分生孢子着生位置，辨认分生孢

子梗、顶囊、小梗和分生孢子。

青霉：在高倍镜下观察菌丝有无隔膜，分生孢子梗、副枝、小梗和分生

孢子的形状等。实验结果：

分析与讨论：

青霉和曲霉的形态有哪些异同？

青霉常分布在霉腐变质的水果、蔬菜、粮食和皮革等物体上，菌体直立菌丝的顶端长有扫帚状的结构，结构的每一个分枝上，生有成串的孢子，成熟的孢子呈青绿色，进行孢子生殖。

曲霉广泛分布在谷物、空气和土壤中，曲霉直立菌丝的顶端膨大成球状，球状结构的表面放射状地生有成串的孢子，孢子随曲霉种类的不同而呈黄色、橙色或黑色。

从皮肤取材查真菌如何检查？

最新微生物检验技术论文2如何写四

不知不觉中我在xx制药公司的质检部已经实习了两个星期。这两个周来我接触到了很多学校里没有看见过的仪器设备，了解到了许多上大三才能学到的药物专业知识。收获颇多！

首先，qc室的很多仪器是我第一次接触到，如智能崩解仪，它是模拟胃肠消化，测定崩解时限的仪器；溶出度测试仪是通过测定溶出液的吸光度来计算溶出量的；脆碎度检查仪是利用计算减失重量的百分比来检测供试品是否符合规定的，等等。

通过每天旁观、参予几个qc姐姐的检验操作流程，我逐渐意识到药品检验的严谨性，来不得半点马虎。做定量分析时，盛装供试液的容器一定要洗净吹干，不能有半点水柱，这是我在犯了一次小错误中留下的深刻教训。做微检时，更要在洁净区做到严格的无菌操作……

以前我印象中的qc只是对成品做检测，到这儿我才知道除了成品，还要检验原料、辅料、中间体。车间的每个工艺流程都需要qc的检验合格报告才能进行下去。甚至外包装、铝箔纸、空心胶囊、实验室用的纯化水都“不容错过”。

经过两个周的学习，我对片剂、胶囊的检查项目有了大体的把握：含量均匀度、含量测定、溶出度、脆碎度、崩解时限、重量差异、有关物质等。高效液相色谱普遍用于有关物质和含量的测定。其中，对照品和供试液的峰面积、浓度用于计算对照品溶液的平均响应系数。

此外，我对薄层色谱法、黏度测定法、旋光度测定法、微生物限度等也有了初步的认识和掌握。这些我以前重未接触过的检验知识为我以后的专业学习奠定了基础。

在两个周的实习中，我还留意了一些小常识和专业术语：崩解时限是指固体制剂在规定的介质中崩解溶散并通过筛网所需时间的限度；配制缓冲液的水应是新沸放冷的水；药品溶解用的是超声波清洗机……以及什么是全检，什么是标示量等等。

“书到用时方恨少”。在qc室的两周实习，让我真切地感觉到了自己专业知识的贫乏。平时在学校里觉得空洞无味的理念知识到了真正的工作实践中，才发觉自己真的学得不精，懂得太少。这也是督促我在今后学习中更加自主积极的一个动力！

最后，我要感谢qc室的几个姐姐对我耐心地讲解、帮助；以及在我实验中所犯小错误的包容和纠正。跟他们相处的日子我感觉很愉快，也受益匪浅。再次表示感谢！

最新微生物检验技术论文2如何写五

各位领导、同事们：

我叫-，20xx年4月来公司担任质量管理部经理一职。数月来，我重点负责gmp认证有关工作和质量管理部日常工作，虽然涉及面广，头绪多，但在公司张总的带领下、在其他班子成员的配合下，在本部门同事的热情支持和帮助下，努力履行着自己分管的所有工作，现就多半年来的工作从以下几个方面进行汇报：

1、服从工作安排，积极投身制水系统改造20xx年3月30日我正式聘入公司开始工作，一周后被临时安排负责制水系统的现场监管和联络工作，该系统主要设备为二级反渗透装臵，从设备设计、选型、采购联络、安装及调试运行各环节，我和qa积极参与和实践，对采用二级反渗透制水设备提出了自己明确的意见和主张，并获得大家的一致认同；在该设备选购过程中，我们积极联系生产商，在8小时内迅速联系到4家制水设备生产商，为公司紧张有限的订货期限赢得选择的时间和空间，有效地缓解和避免了设备采购的紧迫性和盲目性，为启动预备采购方案做了积极地铺垫和补充。二级反渗透制水设备从到厂安装至纯化水水质合格运行累计7天，在此期间，我全面跟踪，加班加点，全心关注和学习制水系统的制水、分配、循环和储存等各个环节，积极参与活性炭柱、石英砂柱的更换和清洗，耐心检查、督促和协调现场安装、运行过程中出现的各种各样问题，并下班后整理成书面报告，次日及时向上级汇报，使存在的问题得到有效落实和解决，促进了制水系统硬件改造的顺利完成。通过学习和实践，我们了解了二级反渗透系统制水原理，维护保养，操作使用方法，提升了业务技能；同时践行了科学、高效的工作方法，为今后的有效管理提供了方法借鉴。

2、加强现场巡查，促进硬件改造整体推进20xx年4月是公司硬件设施处于全面改造的关键时期，除制水系统外，空气净化系统、厂房设施、设备维护等系统和项目均需不同程度的技术处理或维护措施，波及到生产、质量、工程、物料等多个部门，繁杂多样的问题和矛盾容易集中凸现，在此期间，我每天下午16：00后深入基层一线，检查和记录发现的各种问题，并通过检查记录整理汇报落实再检查循环工作模式不断加以解决，截止7月，共计各类检查22次，累计各类问题达130个。通过加强现场巡查和监督，加快了硬件的快速改进，对推动gmp认证进程发挥了积极作用。

3、安排和部署验证总体计划，主动完善相关验证活动 验证是实施gmp的基础，也是gmp认证检查必不可少的内容，为了搞好验证实施，保证验证活动有序开展，我结合公司实际，制定了一份较为系统而详尽的验证总体时间安排计划，主要为净化空气系统、空压系统、设备验证、设备清洁验证及产品工艺验证的具体时间安排，为公司各类验证活动有计划、有步骤实施提供了工作主线和依据，该计划内容基本覆盖了公司所有的关键验证对象和系统，符合gmp验证内容的原则要求，验证时间有条不紊，与生产时间相吻合，合理安排了生产和验证活动，体现了生产活动与验证实施相辅相成，相互统一的本质规律。由于验证工作量大，我主要负责空气净化系统、空压系统及设备清洁验证活动的实施，累计完善验证项目25个，其中涉及公用设施验证8个，设备清洁验证17个，达到了共用系统验证、关键的生产工艺设备清洁验证全覆盖的目标要求，为gmp认证检查创造了坚实基础和条件。

4、参与物料和设备供应商审计，积极履行质量监管职责 20xx年4月12月

期间，我先后4次对药材供应商进行实地考察，第1次考察药材供应商为个体，其主要经营门店为东郊万寿路药材市场，按gmp要求，其不符合供货资质条件，主要原因为：1.该供应商为证照挂靠经营；2.药材饮片加工场所无gmp证书；3.饮片贮存条件不符合gmp要求；4.供应商gmp观念淡薄，饮片包装形式不符合公司质量要求。现场考查结束后，我及时向上级领导书面汇报了考察情况，并明确提出有关处理意见，即不得从该供应商购进药材或饮片。第2次考察主要对象为西安中药饮片厂、西安盛兴中药饮片厂，考查结果确认符合审计要求，并明确向上级领导作了交换意见，要求今后中药材应从通过gmp认证中药饮片厂购进，并有qa共同参与确定供应商。借鉴中药材供应商现场考查的办法和经验，随后对2家真空减压浓缩罐生产商进行了实地考察，并将考察结果和意见向公司领导作了书面汇报。第3、4次主要考察了多种名贵药材和问题药材如鹿茸、红参、淫羊藿、韭菜子的来源，通过市场调查了解了药材质量状况和现状，开拓了视野，增长了见识，对把好药材源头质量关具有十分重要的意义。总之通过物料或设备供应商的现场考查和信息反馈，为公司提供了良好改进建议，并增强了相关部门和工作人员的gmp意识，显示了质量监管的价值和重要性，同时为推进gmp实施做出了积极和正确的引导。

5、积极参与gmp文件的修订及会审，巩固和完善软件新成果 修订和审核文件是日常工作内容必备可少的一部分，gmp认证检查前，我主要参与了质量管理部门相关文件和技术文件的修订、审核，文件类别有《质量手册》1个，《程序文件》22个，《工艺规程》11个，《质量标准》文件累计116个，囊括了中药材、原辅料、包装材料、中间体及成品所涉及的所有标准，检验操作规程79个，质量管理文件47个，其中对“十七味补肾膏”、“荣发胶囊”、“感冒退热颗粒”等产品工艺规程进行了反复复核和及时会审，保证各产品工艺与产品批准证明文件所规定的内容相一致；通过对《质量标准》的修订和实施，对进一步健全质量保证体系，控制产品质量起到良好的促进作用。删除了质量管理文件、卫生管理文件与客观实际情况不相适应的部分，使文件更加切合实际和具有可操作性，更好地满足规范指导生产和检活动的要求；积极协助qa修订、审核产品召回管理规程，删繁去冗，去粗取精，使其召回程序和活动与国家相关法规制度要求相一致，文件层次脉络清楚，面貌焕然一新；gmp认证后，《中国药典》（20xx年版）的颁布实施，我积极督促相关质量标准和检验操作规程的修订，使相关文件与药典标准有效接轨，保证新旧标准体系平稳过渡。

6、开展和参与gmp培训，推动生产质量管理跃上新台阶 实施gmp管理是药品生产企业保障药品质量的一个永恒主题，今年是公司迎接gmp再认证的关键年份，在投入资金做好硬件改造的同时，软件的提升也是gmp认证检查的一项十分重要的内容。为此，从20xx年4月份起，公司就开始着手准备对员工培训的准备工作，进入5月份，gmp培训已提上工作议事日程，由人事行政部会同质量管理部、生产技术部、设备工程部、物料部相关部门负责人及技术人员分别制定了各部门的年度培训计划，并由质量管理部参与制定了公司级的gmp培训计划，公司级的gmp培训计划及内容主要体现法规政策、gmp规范、微生物基础知识及产品生产工艺技术等内容，部门级培训主要内容为各相关岗位sop培训。6月～

7月份，gmp培训全面展开，我培训讲授的内容是《中华人民共和国药品管理法》《药品管理法及实施条例》、gmp自检、设备清洁验证等相关内容，各相关岗位的人员大部分均参加了培训，80%的人员培训成绩优异，培训总计4次，累计时间达6小时。gmp认证通过后，我积极按公司培训计划要求，先后对销售部工作人员法规政策和产品知识方面的培训，主要内容有《中华人民共和国药品管理法》、《药品说明书和标签管理规定》、《药品召回管理办法》、《药品不良反应报告和监测管理办法》、《脱发与治疗》等，累计4小时；对煎膏剂车间进行验证管理等方面知识的培训，累计4小时。通过多层次、多角度的培训，使员工懂得按gmp组织生产是法律明确要求，更加清晰了假药和劣药的概念，了解了什么行为是合法的，什么行为是违法的；使药品销售人员学会正确用法律的武器武装自己的.头脑，并掌握和了解了荣发胶囊治疗脱发过程的基本机理及其治疗特点和不足，对正确评估产品疗效有了全面而客观的认识，有助于该品营销活动过程中的技术交流和宣传。总之，培训使员工的法制意识和gmp意识大大提高，为实现质量管理体系的良好运行奠定了基础和前提。 7、尽职尽责，努力当好排头兵 能担任质量部经理一职是上级领导和大家对我的信任，因而我觉得要身体力行，做出表率。为了做好本职工作，我在思想上积极要求上进，除认真学习国家有关药品法律、法规政策外，还坚持每天尽量浏览和阅读国家经济、政治、文化等方面的理论知识，不断提高自身的政治理论素养。在思想作风上实事求是，表里如一；在工作作风上认真严谨，坚持民主，每逢重大问题，能坚持跟领导或同事协商的原则，不搞独断专行，不搞一言堂，更不搞强迫命令，在工作中，都能发挥集体智慧，把每一项工作做好。讲求实效；待人处事上光明磊落、诚实、守信；在工作期间做到衣着整洁得体、语言文明规范，努力在各方面使自己能成为标兵。虽然作为质量部经理，但我从没有搞过特殊化，自进厂工作以来，我从没有无故缺席、迟到或早退，有事请假。认证期间坚持无条件加班，积极配合公司领导的工作安排，做到了以身作则。作为质量管理部经理，应是总经理的助手和智囊团成员，因此，我非常重视团队精神和服从意识，深知思想和行动上与保持一致才是提高工作效率的思想基础，领导安排的工作任务能积极配合协助或独立完成，我经常深入基层一线，并把存在的问题和自己的意见及看法能及时给公司反馈，发挥了员工和公司之间的桥梁和纽带作用。

综上所述，任职近一年来，虽然在自己的岗位上做了一些工作，取得了一定成绩，但还存在薄弱环节，主要表现在：

1、对有关理论掌握仍不透彻，需继续加强理论学习，提高理论水平。

2、对质量管理的工作经验不足，对理化分析和微生物检验方面的知识学得不够多，不够精，需在下步工作中认真总结，提高业务技能。

3、下车间检查次数少，深入车间检查还应更扎实一些。

4、本人自信心不足，工作中主观能动性和创新性不够。

最新微生物检验技术论文2如何写六

质粒dna的提取、纯化及检测

姓名：xxx学号：2011001400xx年级：20xx级生物基地班 实验日期：20xx年9月16日—30日组别：6组 同组者：xx

1、掌握碱变性提取法提取大肠杆菌中质粒dna的原理和方法。

2、学习并掌握凝胶电泳进行dna的分离纯化的实验原理。

3、学习并掌握凝胶的制备及电泳方法。

4、学习并掌握凝胶中dna的分离纯化方法。

1、质粒dna的制备方法

质粒（plasmid）是独立存在于染色体外、能自主复制并能稳定遗传的一种环状双链dna分子，分布于细菌、放线菌、真菌以及一些动植物细胞中，但在细菌细胞中含量最多。细菌质粒大小介于1～200kb之间，是应用最多的质粒类群，在细菌细胞内它们利用宿主细胞的复制机构合成质粒自身的dna。

质粒dna的制备包括3个步骤：①培养细菌，使质粒dna大量扩增；②收集和裂解细菌；③分离和纯化质粒dna。主要方法包括：碱裂解法：0。2molnaoh+1%sds；煮沸裂解法：沸水煮沸40秒；sds裂解法：10%sds，一般用于质粒大量提取。在实际操作中可以根据宿主菌株类型、质粒分子大小、碱基组成和结构等特点以及质粒dna的用途进行选择。本实验选择碱裂解法提取质粒dna。

2、质粒dna的提取——碱变性提取法

在细菌细胞中，染色体dna和质粒dna均被释放出来，但是两者变性与复性所依赖的溶ph值不同。在ph值高达12。0的碱性溶液中，染色体dna的氢键断裂，双螺旋结构解开而变性；共价闭合环状质粒dna的大部分氢键断裂，但两条互补链不完全分离。因为它们在拓扑学上是相互缠绕的。当用ph值4。6的kac（naac）高盐溶液调节碱性溶液至中性时，变性的质粒dna可恢复原来的共价闭合环状超螺旋结构而溶解于溶液中；但染色体dna不能复性，而是与不稳定的大分子rna、蛋白质—sds复合物等一起形成缠连的、可见的白色絮状沉淀。这种沉淀通过离心，与复性的溶于溶液的质粒dna分离。溶于上清液的质粒dna，可用无水乙醇和盐溶液，使之凝聚而形成沉淀。由于dna和rna性质类似，乙醇沉淀

dna的同时，也伴随着rna沉淀，可利用rnasea将rna降解。质粒dna溶液中的rnasea以及一些可溶性蛋白，可通过酚/氯仿抽提除去，最后获得纯度较高的质粒dna。

3、凝胶电泳进行dna分离纯化

电泳（electrophoresis）是带电物质在电场中向着与其电荷相反的电极方向移动的现象。各种生物大分子在一定ph条件下，可以解离成带电荷的离子，在电场中会向相反的电极移动。凝胶是支持电泳介质，它具有分子筛效应。含有电解液的凝胶在电场中，其中的电离子会发生移动，移动的速度可因电离子的大小形态及电荷量的不同而有差异。利用移动速度差异，就可以区别各种大小不同的分子。因而，凝胶电泳可用于分离、鉴定和纯化dna的片段，是分子生物学的核心技术之一。

凝胶电泳技术操作简单而迅速，分辨率高，分辨范围广。此外，凝胶中dna的位置可以用低浓度荧光插入染料如溴化乙锭（ethidium bromide，eb）或sybr gold染色直接观察到，甚至含量少至20pg的双链dna在紫外激发下也能直接检测到。需要的话，这些分离的dna条带可以从凝胶中回收，用于各种各样目的的实验。

分子生物学中，常用的两种凝胶为琼脂糖（agarose）和聚丙烯酰胺凝胶。这两种凝胶能灌制成各种形状、大小和孔径，也能以许多不同的构型和方位进行电泳。聚丙烯酰胺凝胶分辨率高，使用于较小分子核酸（5—500bp）的分离和蛋白质电泳。它的分辨率非常高，长度上相差1bp或质量上相差0。1%的dna都可以彼此分离，这也是采用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行dna序列分析的分子基础。虽然它能很快地进行电泳，并能容纳较大的dna上样量，但是与琼脂糖凝胶相比，在制备和操作上繁琐。琼脂糖是从海藻中提取的长链状多聚物，由β—d—吡喃半乳糖与3，6—脱水—l—吡喃半乳糖组成，相对分子质量为104—105。琼脂糖加热至90℃左右，即可溶化形成清亮、透明的液体，浇在模版上冷却后形成凝胶，其凝固点为40—45℃。琼脂糖凝胶相对于聚丙烯酰胺凝胶分辨率低，但它的分离范围更大（50至百万bp），小片段dna（50—20000bp）最适合在恒定轻度和方向的电场中水平方向的琼脂糖凝胶内电泳分离。琼脂糖凝胶电泳易于操作，适用于核酸电泳，测定dna的相对分子质量，分离经限制酶水解的dna的片段，进一步纯化dna等。

琼脂糖凝胶电泳是一种常用的方法。在溶液中，由于核酸有磷酸基而带有负电荷，在电场中向正极移动。dna在琼脂糖凝胶中的电泳迁移率主要取决于6个因素：样品dna分子的大小、dna分子的构象、琼脂糖浓度、电泳所用电场、缓冲液和温度。

1、实验仪器

培养皿、接种环、三角瓶、酒精灯、恒温振荡培养箱、50ml离心管、1。5ml塑料离心管（eppendorf管）、高速离心机、漩涡振荡器、微量移液器、不同型号枪头、天平、制胶槽、梳子、电泳仪、吸管、量筒、微波炉、灭菌锅、恒温水浴锅、试剂瓶、卫生纸和记号笔、手套等。

2、实验试剂

lb培养基，抗生素ap（氨苄青霉素），溶液ⅰ，溶液ⅱ，溶液ⅲ，rnasea母液，te缓冲液，饱和酚，氯仿/异戊醇混合液，酚/氯仿/异戊醇（pci）混合液，预冷无水乙醇，tae电泳缓冲液（10×），上样缓冲液（6×），琼脂糖，溴化乙锭（eb），dna相对分子质量标准物dna marker λ/hind ⅲ，5mol/l ph 5。2的醋酸钠。

1、准备实验

配制lb液体培养基，分装到100ml的三角瓶中20ml，300ml的三角瓶中50ml，另配lb固体培养基；准备1000ul、200ul、10ul移液枪尖各一盒，1。5ml离心管若干于500ml三角瓶中，50ml离心管2个 ，将上述物品包好连同配好的培养基一同灭菌。

2、菌体培养

在含有ap的lb平板上挑取一环携带有质粒puc19的e。coli dh5单菌落，接种于20mllb液体培养基中进行37℃振荡过夜培养，培养基中加ap100ul

（100ug/ml），质粒puc19具有ap抗性基因，使得带有puc19的质粒得以生长。 过夜培养后菌体量大，杂质较多，然后用移液枪吸取过夜培养物2ml转接于50mllb液体培养基中，培养基中加入ap250ul，37℃振荡培养4—6h至对数生长期后期，生长速率快，代谢旺盛，酶系活跃，杂质少，适合提取质粒。

3、质粒提取

（1）称量空的50ml离心管的重量为14。331g，然后将三角瓶中的菌液倒至管中，不能倒满，液面距管口约1cm，7000rpm离心5分钟后弃去上清液，收集菌体细胞。

（2）向离心管中悬滴加入5ml冰预冷的溶液ⅰ打散菌体洗涤，用漩涡振荡器使之充分悬浮后用枪尖吹吸混匀，同步骤（1）离心，弃去上清，将离心管倒置于吸水纸上，使上清液全部流尽干燥，然后称重得14。437g，则菌体质量为106mg。

（3）洗涤后每100mg菌体应加入冰预冷的溶液ⅰ1ml，106mg菌体按100mg菌体处理，加入溶液ⅰ1ml，打散菌泥、吹吸混匀，冰浴5min。溶液ⅰ中的葡萄糖使

溶液密度增加，悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管子的底部；维持渗透压，防止细胞提前破裂，防止dna受机械剪切力作用而降解。edta是ca2+和mg2+等二价金属离子的螯合剂，可抑制dnase的活性，抑制微生物的生长。tris—cl溶液提供适当的ph。

（4） 按比例加入新配制的溶液ⅱ2ml（与溶液ⅰ对应），轻加轻摇，冰浴5min。溶液变清亮透明粘稠如蛋清状。溶液ⅱ中的naoh使细胞膜发生了从bilayer（双层膜）结构向micelle（微囊）结构的相变化导致细胞溶解。同时，强碱性使染色体dna、质粒dna和蛋白质变性；sds为下一步沉淀做铺垫。

（5）按比例加入冰预冷的溶液ⅲ1。5ml（与溶液ⅰ、ⅱ对应），轻加轻摇，冰浴10min。溶液出现白色絮状沉淀。沉淀为蛋白质sds复合物、细胞碎片和其他大分子成分。溶液ⅲ中的hac中和naoh，因为长时间的碱性条件会打断基因组dna，只要是50－100 kb大小的片断，就不能再被pds共沉淀。同时变性的质粒dna复性。反应形成的高盐环境进一步加速了沉淀。

（6）12000rpm离心15min，白色沉淀聚集在离心管一侧，用移液枪将上清液转移到另一洁净的离心管中。然后向上清液中加入1/10体积的3mnaac混匀，加入2倍体积的冰无水乙醇，混匀，—20℃下沉降30分钟。乙醇可以任意比和水相混溶，乙醇与核酸不会起任何化学反应，对dna很安全，因此是理想的沉淀剂。 dna溶液是dna以水合状态稳定存在，当加入乙醇时，乙醇会夺去dna周围的水分子，使dna失水而易于聚合。在ph为8左右的溶液中，dna分子是带负电荷的，加一定浓度的naac或nacl，易于互相聚合而形成dna钠盐沉淀。

（7） 以12000rpm离心15min，小心倒去上清液，得到dna沉淀。加入3ml70%冰乙醇，轻轻地覆盖沉淀，不打散沉淀，洗涤一次。

（8）以12000rpm离心5min，离心管底部dna沉淀所在面应与收集沉淀面一致。去掉上清液，将离心管上沉淀部位做好标记，将离心管倒置于吸水纸上，干燥5min。粗提取的质粒呈浅黄色，随着水分的减少质粒变为无色。所以为了完全溶解质粒，要在离心管上标记质粒所在位置。

（9）将dna沉淀溶于1mlte缓冲液中，移液枪吹吸助溶，然后将溶解液转移到一个eppendorf管中。te是ph缓冲液，为dna提供稳定的生理状态，呈弱碱性，有利于保护碱基对。同时含有edta是二价阳离子的螯合剂，抑制dna酶作用。

4、质粒纯化

（1）eppendorf管中加入rnase a（纯浓度＞50ug/ml），37℃保温0。5—1h

（2）将上述的溶液平均分配到2个1。5ml的微量离心管中，每管0。5ml，分别加入与溶液等体积的（500ul）tris饱和苯酚溶液，振荡混匀，7000rpm，离心5min，上清液转移到一洁净的eppendorf管中。苯酚是经tris饱和后的，显黄色。苯

酚加入后，溶液分层，苯酚向下，下层呈浅黄色，上层溶液无色，在中间产生大量白色沉淀，此为变性后的蛋白质。

（3）加入等体积的（500ul）苯酚/氯仿溶液（1：1），振荡混匀， 7000rpm，离心5min，上清液转移到到另一洁净的eppendorf管中。苯酚是强的蛋白变性剂，但是苯酚留在质粒溶液中会影响dna的酶切，它本身易被氧化，会损伤质粒。氯仿也是蛋白变性剂，但是比酚弱，且能溶解质粒中的脂类，溶解苯酚，去除溶液中的苯酚。异戊醇则可起消除抽提过程中出现的泡沫，有利于分层更明显。此时溶液中已看不到明显的白色沉淀，但仍有蛋白质的存在。

（4）加入等体积的氯仿溶液，振荡混匀， 7000rpm，离心5min，上清液转移到一洁净的eppendorf管中，得上清液400ul。

（5）向上清液中加入1/10体积的naac混匀，再加入2倍体积的冰无水乙醇，混匀，—20℃下沉降30分钟。

（6）以12000rpm，离心15min，弃去上清液，得到dna沉淀，为白色。

（7）向dna沉淀中加入70%冰乙醇200ul，不打散沉淀，洗涤。然后以12000rpm离心5min，离心管底部dna沉淀所在面应与收集沉淀面一致。

（8）去掉上清液，将离心管倒置于吸水纸上，室温干燥。用50ulte溶解于1管中。

5、质粒检测

（1）称取0。4g的琼脂糖，置于一锥形瓶中，在三角瓶上标好液面位置，加入40ml的1×tae电泳缓冲液，再加入5—10ml重蒸水，以补充在溶胶过程中损失的水分。然后置微波炉加热至完全溶化，溶液透明。冷却至50℃左右，倒入制板槽制板。

（2）待胶凝固后，小心拔起梳子，使加样孔端置阴极段放进电泳槽内。在槽内加入1×tae 电泳缓冲液，至液面覆盖过胶面2—3cm。取1μl加电泳载样液和3μl质粒样品于小纸片上，用移液枪混匀。

（3）电泳1h，观察溴酚兰的带（蓝色）的移动。

（4） 把胶槽取出，小心滑出胶块，放进eb溶液中进行染色，完全浸泡约5min。

（5）凝胶成像仪观察。

（1）滴加溶液ii时，要逐滴加入，且要轻加轻摇溶液使之混匀，整体动作要快，因为强碱在溶液中停留时间不能过长，否则会破坏质粒dna。

（2）加入溶液iii后，生成了大量的絮状沉淀，溶液iii中和强碱使质粒复性，不可剧烈震荡， 防止染色体dna断裂，应该上下颠倒离心管，使其混匀。

最新微生物检验技术论文2如何写七

尊敬的各位领导、同事们：你们好!

在时间的长廊上，我在质检岗位已经6年了，在领导和同事们的关心帮助下，我认真做好本职工作，坚持学习，与时俱进，对领导交办的事项从不马虎，工作兢兢业业，忠于职守，顺利完成各项工作任务。在思想政治素质、业务知识、质量检验技术能力水平方面有了一定程度的进步和提高，在即将过去20xx年，质量监督技术所得到了稳中有升的发展是单位领导正确领导的结果，我做为质检员密切靠拢在局党组的正确指示下，以“发展、提效、规范、创新”的先进工作思路，积极完成各项质检工作任务。现将工作情况总结如下：

一、坚持政治思想学习

本人严格按照局机关领导和技术所领导提出的“发展、提效、规范、创新”，“勤于学习、善于创造、乐于奉献”的要求，坚持“讲学习、讲政治、讲正气”，始终把耐得平淡、舍得付出、默默无闻作为自己的准则;深入学习，不断提高观察、分析和处理问题的能力，用各方面的知识充实自己，加快知识更新，增强应变能力。

二、认真加强专业知识学习，不断充实自己的业务知识

对于我来说，技术所是一个全新发展的单位。为了能尽快适应环境，更好地开展工作，本人努力坚持“向人学、向书本学”的学习型适应思路：一方面，虚心向老同志请教，通过他们对工作的热情、和积极性来规范自己的工作态度;另一方面，认真学习历年的《食品安全法》、《质量监督检验理论基础学》、《食品生产许可法律法规》《食品检验基础学》、《现代微生物学》等书籍杂志并积极参加省局审查员培训的学习，从中汲取营养，努力掌握有关质量方面的专业知识，在最短时间内把自己塑造成为了一名优秀的质量监督员。

三、其他工作

工作时必须做到四个字：认真细心。做为质检，必须要有坚定不移、不厌其烦的精神。不断加强和提高自身素质的同时自学《统计学》等书籍。在统计分析工作中，力求做到全面与重点相结合，在全面分析的基础上，对突出的重点问题，认真做好分析，对主要指标的变化情况，及时向领导汇报，使其及时了解、掌握质量情况动态。

四、不足之处

过去的一年来，本人作出了一定的努力，在领导和同志们的关心支持下，也取得了一定的成绩，但距领导对我的要求还有不少的差距：

1、在工作中与领导交流沟通不够。

2、由于自己比较年轻，工作经验不足，所以在开展工作时缺乏魄力。特色的亮点还不突出。综合协调能力方面欠缺，在工作的组织指挥上，缺乏坚定性。

3、具体工作当中存在检查力度不够和工作积极性不高等缺点。有时考虑问题不够周全，处理问题不够细致。学习不够，知识面不广。

以上这些都有待于在今后的工作中，克服缺点，进一步完善和提高。

总之，我在车间工作岗位上履行了一名质量检查人员的职责，取得了一定成绩。但是，成绩只属于过去，明年我将迎接新的挑战，珍惜新的机会，扬长避短，做好新的工作，争取新的更大的进步